2种不同形态不依赖Ca2+α-淀粉酶的纯化与表征

• 作者: 何冰芳 朱婧 王成华 王青艳 申乃坤 秦艳 黄日波
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 耐酸 淀粉酶 枯草芽胞杆菌 钙 水解产物
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 44-49
• 分类号: Q556.2
• 字数: 3188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2012.05.009

摘要

纯化表征了枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis CN7产生的2种不同形态的不依赖Ca2+的α-淀粉酶,对其酶解产物进行了高效液相色谱(HPLC)分析.结果表明:通过加热除杂、超滤、(NH4)2SO4沉淀和分子筛层析,一次性获得了纯化倍数提高36倍的电泳纯成熟肽形式α-淀粉酶Amy7B和提高75倍的截短体形式α-淀粉酶Amy7S；Amy7B和Amy7S的最适pH为6.5,最适温度为65℃,酶活性均不依赖于乙二胺四乙酸(EDTA)和Ca2+；酶解产物主要由葡萄糖和麦芽糖组成.Amy7B的相对分子质量为6.7×104,半衰期温度为59.6℃,比活力为(905.99±96.52) U/mg.与之相比,Amy7S的相对分子质量小约2.0×104(为4.7×104),半衰期温度高2.7℃(为62.3℃),比活力高1.05倍(达到(1853.87±75.61) U/mg).