来源于Bacillus circulans的重组β-CGT酶的分离纯化及其生化性质分析

• 作者: 李兆丰 李才明 洪雁 程力 顾正彪 黄敏
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 环糊精葡萄糖基转移酶 环糊精 枯草杆菌 分离纯化 生化性质
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 360-368
• 页数: 9页
• 分类号: Q555
• 字数: 6173字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.04.005

摘要

作者将来源于Bacillus circulans STB01的重组β-CGT酶进行分离纯化,并对其生化性质进行了分析.结果表明,采用Phenyl HP柱疏水层析、Q-HP柱阴离子交换层析两步能很好的对重组β-CGT酶进行纯化,酶的回收率达到45.3％.重组β-CGT酶的表观相对分子质量约为76 500,且相对分子质量呈单分散,说明酶蛋白分子在溶液中是以单聚体形式存在.该酶的最适pH为6.5,且在甘氨酸-氢氧化钠缓冲液中体现出更好的热稳定性;最适温度为60 ℃.该酶的活性不依赖于金属离子,在酶催化反应的整个过程中,其主要产物均为β-环糊精.以玉米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉为底物时,该酶环化反应的动力学性质不符合米氏方程;而分别以可溶性淀粉、麦芽糊精(DE 5、15、25)为底物时,其环化反应的动力学性质能用米氏方程很好的进行描述.