osw2对酿酒酵母孢子固定化酶影响的分析

• 作者: 中西秀树 李子杰 赵强 高晓冬
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 酿酒酵母孢子 α-半乳糖苷酶 固定化酶
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 845-852
• 页数: 8页
• 分类号: Q786
• 字数: 4616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.08.010

摘要

构建了α-半乳糖苷酶(Mel1p)的多拷贝质粒pRS426-TEFpr-MEL1,转入酿酒酵母野生型AN120及osw2△突变株并进行固定化酶活性测定.实验分别选取蜜二糖、棉子糖(三糖)与水苏糖(四糖)3种低聚寡糖作为Mel1p的底物,检测两种菌株孢子固定化酶对这3种底物的催化活性,结果表明野生型AN120酵母孢子壁的孔径最大只允许介于三糖和四糖之间的底物通过,四糖不能通过;而osw2△突变株酵母孢子壁的孔径可以允许四糖通过.通过孢子固定化酶保护性实验,发现孢子固定化酶可以完全抵抗2％ SDS的处理,也可部分抵抗10％ SDS的处理.通过8 mol/L尿素处理后,酶活检测发现野生型AN120酵母孢子可阻挡尿素对孢子固定化酶的影响,而osw2△孢子不能;蛋白免疫印迹分析进一步表明,尿素处理后野生型AN120酵母孢子固定化酶的含量几乎不变,而osw2△突变株孢子固定化酶的含量明显降低,说明尿素可进入osw2△突变株孢子内部溶解并降低固定化酶的含量,但对AN120酵母孢子无影响.本研究也在多种突变株孢子中表达Mel1p,并进行活性比较,发现osw2△,osw2△ydl186w△及osw2Aydr326c△突变株固定化酶均有很高的催化活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高晓冬	江南大学生物工程学院	39	30	3.0	4.0
2	李子杰	江南大学生物工程学院	21	18	3.0	3.0
3	中西秀树	江南大学生物工程学院	26	27	3.0	4.0
4	赵强	江南大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0