重组环糊精葡萄糖基转移酶温控型工程菌的构建及其培养条件的优化

• 作者: 凌凯 凌国庆 凡宁 张洪斌 胡雪芹
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 蜡状芽孢杆菌 β-环糊精葡萄糖基转移酶 工程菌 表达 培养条件
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 155-159
• 页数: 5页
• 分类号: Q814
• 字数: 3239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201411031

摘要

采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法从蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)中扩增了β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-cyclodextrin glucanotransferase,β-CGTase)基因,将该基因克隆到pBV220质粒中,转化E.coli DH5α,经氨苄青霉素抗性筛选和酶切验证后,得到能表达β-CGTase的重组大肠杆菌E.coliDH5α/pBVcgt.通过对工程菌产酶条件的优化,得到最佳产酶条件为:OD600nm值达到1.0、初始培养温度30℃、发酵培养基初始pH 8.0、温度梯度诱导39℃培养0.5h,40℃培养0.5h,41℃培养1h,42℃培养2h.酶活力由优化前的445 U/mL提高到956 U/mL,酶活力提高了1.15倍.温度梯度诱导比直接诱导酶活力提高20％.该酶的克隆表达以及发酵条件的研究表明,该酶能在大肠杆菌原核表达体系中高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洪斌	合肥工业大学医学工程学院	59	436	13.0	17.0
2	胡雪芹	合肥工业大学医学工程学院	35	219	9.0	12.0
3	凌凯	合肥工业大学医学工程学院	2	6	2.0	2.0
4	凡宁	合肥工业大学医学工程学院	1	4	1.0	1.0
5	凌国庆	合肥工业大学医学工程学院	2	4	1.0	2.0