重组α-环糊精葡萄糖基转移酶表达条件的优化及其产物专一性的分析

• 作者: 宋炳红 朱启忠 薛智权 钞亚鹏 钟健 钱世钧
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: α-环糊精葡萄糖基转移酶 PQE30 表达及优化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 30-36
• 分类号: Q812|Q815
• 字数: 4516字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2012.01.006

摘要

将来源于Bacillus sp 602 -1的α-环糊精葡萄糖基转移酶(ot-CGT)基因(cgt)插入到表达载体PQE30中,构建重组质粒PQE30/cgt,成功转化宿主菌E coli M15后,得到重组菌株E coli M15 (PQE30/cgt).在IPTG的诱导下得到酶表达的最适条件:TB培养基,0.01 mmol/L IPTG,诱导温度16℃,胞内酶比活力最高可达5 209 U/mL;加入IPTG 24 h后,添加甘氨酸和甘露醇会促使酶向胞外分泌.酶蛋白自诱导表达的适宜条件为在TB培养基中添加乳糖3.0 g/L,葡萄糖1.2 g/L,16℃培养96 h,酶比活力达到8 635 U/mL,明显高于IPTG诱导的效果.通过SDSPAGE验证了上述结论.酶催化转化实验表明:重组酶转化质量分数为1％可溶淀粉24h后,α-环糊精(α-CD)转化率可达38.2％,α和β的峰面积比约为3.4:1,α-CD具有较高的专一性,因此该重组α-CGT酶具有较好的工业化应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱启忠	山东大学威海分校海洋学院	81	572	11.0	18.0
2	钱世钧	中国科学院微生物研究所	33	1044	14.0	32.0
3	钞亚鹏	中国科学院微生物研究所	18	498	8.0	18.0
4	宋炳红	山东大学威海分校海洋学院	5	21	3.0	4.0
5	薛智权	中国科学院微生物研究所	2	8	2.0	2.0
6	钟健	中国科学院微生物研究所	2	2	1.0	1.0