环介导恒温扩增快速检测植物油中掺假地沟油方法的建立

• 作者: 伍欣然 徐红伟 曹忻 杨具田 臧荣鑫 蔡勇 赵彩红
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 环介导恒温扩增技术 动物源性成分 地沟油 鉴别 现场检测
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 240-244
• 页数: 5页
• 分类号: TS207.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2018.02.045

摘要

以植物油中不应存在动物源性成分为鉴定依据,建立食用植物油中掺假地沟油的环介导恒温扩增(Loopmediated isothermal amplification,LAMP)快速检测方法,以动物线粒体DNA为检测靶标,根据脊椎动物线粒体基因组高度保守序列设计了两条外引物(F3、B3)和两条内引物(FIP、BIP),采用LAMP实时荧光法和染色法对扩增产物进行比较分析,对甜菜碱和Bst DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)量进行了优化,并进一步评价方法的特异性、灵敏度和稳定性.结果表明,在1.6 μmol/L内引物(FIP和BIP),0.2 μmol/L外引物(F3和B3),6 mmol/L MgSQ,1.6 mmol/L dNTP,10×Thermo pol Buffer,8 U Bst DNA聚合酶,扩增温度为65℃,扩增时间为1h的优化条件下,能够一次同时扩增出牛、羊、猪和鸡等脊椎动物DNA序列,检出植物油中最低含量为0.01 ng/μL的动物源性DNA,优化后的LAMP方法特异性好,仅能扩增出动物源性DNA序列、重复性好、稳定性高,可用于油脂中动物源性成分的检测,为油脂鉴伪和地沟油的鉴别提供一种稳定、高效、适应性强的现场快速检测技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡勇	西北民族大学实验中心	46	229	9.0	13.0
2	杨具田	西北民族大学生命科学与工程学院	74	457	13.0	17.0
3	臧荣鑫	西北民族大学生命科学与工程学院	66	357	12.0	15.0
4	曹忻	西北民族大学实验中心	28	73	5.0	7.0
5	徐红伟	西北民族大学实验中心	30	99	6.0	8.0
6	赵彩红	西北民族大学生命科学与工程学院	4	11	2.0	3.0
7	伍欣然	西北民族大学生命科学与工程学院	2	5	2.0	2.0