重组枯草芽孢杆菌全细胞催化合成钙二醇的初步研究

• 作者: 李雨虹 耿鹏 刘建民 时祎 辛瑜 石贵阳 张梁
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 钙二醇(25-hydroxy vitamin D3,25-OH VD3) 枯草芽孢杆菌 VD3羟化酶 异源表达 全细胞催化
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.026522

摘要

钙二醇(25-hydroxy vitamin D3,25-OH VD3)是一种具有广泛生理活性及药用价值的物质.该文旨在通过分子生物学手段构建1株异源表达VD3羟化酶(VD3 hydroxylase,Vdh)的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-vdh,使其可以利用细胞催化系统合成25-OH VD3.该重组菌株经诱导表达后,首先利用CO差光谱法评价Vdh的体外活性,并将其用作全细胞催化剂合成25-OH VD3,随后通过优化温度、时间、转速及pH等全细胞转化条件,提高其转化合成25-OH VD3的产量.结果表明,37℃下培养24 h后,重组枯草芽孢杆菌B.subtilis WB600/pMA5-vdh的菌体裂解物酶活力达0.56 nmol/g;并且在底物质量浓度为0.1 g/L、外加18 g/L葡萄糖和22.5 g/L的2-羟丙基-β-环糊精的条件下,控制初始pH为7、反应温度30℃、转速200 r/min时进行全细胞转化反应48 h,得到25-OH VD3的转化率为10.36％,以上研究结果为制备和生产食品级25-OH VD3提供了新的思路.