重组大肠杆菌BL21(DE3)-pET28a(+)-bgl诱导表达β-葡聚糖酶的条件优化

• 作者: 李崎 李永仙 郑飞云 顾国贤
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组大肠杆菌 发酵条件 优化 诱导 β-葡聚糖酶
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与发酵工程
• 页码范围: 250-255
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.97
• 字数: 4142字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-1689.2009.02.022

摘要

研究自行构建的产β-葡聚糖酶的工程菌E.coli BL21(DE3)-pET28a(+)-bgl在LB培养基中的生长特性,考察种子液的菌龄、培养基起始pH、接种量及诱导起始时发酵液菌浓度等对β-葡聚糖酶产生水平的影响;通过正交试验确定诱导剂IPTG及乳糖添加量、诱导温度及诱导剂作用时间.结果表明:培养基起始pH 7.0,对数生长中期的种子液(OD600为0.35)以接种量(体积分数)10%接入摇瓶发酵培养,37 ℃,200 r/min培养约3 h,菌液OD值达到1.0左右,添加终浓度分别为0.033 6 mmol/L的IPTG及10 mmol/L乳糖,24℃诱导6 h,发酵液清液中酶活达到最高(336.33 U/mL),菌体生长量为1.12 g/L,发酵液中总酶活达到459.32 U/mL,是原始菌株在相同条件下所产酶活的6.62倍.采用优化培养条件及诱导剂作用条件,重组菌在TB培养基中酶活水平进一步提高,诱导剂作用10 h,发酵清液中酶活为1 090.31 U/mL,总酶活1 570.83 U/mL,是原始菌在该条件下酶活的19.73倍,显示出重组菌具有广阔的工业化应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾国贤	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	161	1519	20.0	28.0
2	李崎	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	216	1386	18.0	26.0
3	李永仙	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	60	441	13.0	19.0
4	郑飞云	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	54	351	12.0	16.0