链霉菌壳聚糖酶的纯化及其酶学性质

• 作者: 冯志彬 周楠楠 孔云红 明永飞 杨立红 程仕伟
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 酶学性质 壳聚糖酶 分离纯化 链霉菌
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 52-58
• 页数: 7页
• 分类号: Q814
• 字数: 4777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2013.03.010

摘要

分离纯化从烟台近海土壤筛选的链霉菌来源壳聚糖酶,并对其酶学性质进行研究.通过(NH4)2SO4分级沉淀分离得粗酶,透析后经Sephadex G-100柱纯化,得到2种壳聚糖酶(ChA和ChB).SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Sephadex G-75凝胶过滤确定ChA的相对分子质量,研究ChA的最适底物水解条件、热稳定性、水解动力学及金属离子对酶活性影响.结果表明:ChA为单亚基蛋白,相对分子质量为4.16×104,在220和280 nm处呈现两个紫外吸收峰,催化水解壳聚糖的最适pH为5.0～5.5,最适温度为55℃.热稳定性实验表明:30℃温育1h后酶活为初始酶活的33.3％,40℃温育1h后酶活为初始酶活的22.2％.ChA的酶促反应初速率为6.2×10-3 μmol/(mL· min),Vmax为0.318 μmol/(mL·min),Km为1×10-2mg/mL,且对底物表现相对专一性.K+、Na+、Li+、Mg2+、Ca2+、Ba2+ Zn2+、Cu2+和Co2+对ChA活力均表现为抑制作用,过渡金属离子Mn2+对酶有激活作用,重金属离子Hg2+、Ag+、Cd2+和pb2+对酶均有较强的抑制作用.Mn2+和Zn2+的动力学研究表明,Mn2+对酶为混合型激活作用,Zn2+对酶为竞争性抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨立红	鲁东大学生命科学学院微生物工程系	38	484	14.0	19.0
2	冯志彬	鲁东大学生命科学学院微生物工程系	45	258	9.0	13.0
3	程仕伟	鲁东大学生命科学学院微生物工程系	37	161	7.0	10.0
4	周楠楠	鲁东大学生命科学学院微生物工程系	1	3	1.0	1.0
5	孔云红	鲁东大学生命科学学院微生物工程系	1	3	1.0	1.0
6	明永飞	鲁东大学生命科学学院微生物工程系	7	179	4.0	7.0