Serratia marcescens H30脂肪酶的重组可溶表达、固定化及其酶学性质

• 作者: 吴向萍 徐晶晶 苏二正 马昱澍 魏东芝
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 工学
• 关键词: 黏质沙雷氏菌 脂肪酶 可溶表达 固定化 手性拆分
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: TQ925
• 字数: 4876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2014.06.007

摘要

为了提高Serratia marcescens H30脂肪酶的可溶表达水平，分别将目的基因与 pGEX 4T 1、pET28a和pET32a构建重组表达载体，转入大肠杆菌BL21（ DE3），通过优化诱导过程，发现可溶性酶的最高活性可达25000 U／L。再经Ni2＋亲和柱纯化、LH EP 固定化后，固定化酶的比酶活为214 U／g（以1 g湿质量计），酶活回收率为51％。固定化后重组脂肪酶的最适温度由30℃提高到35℃，最适pH从7?0偏移至8?0左右，并且稳定性也有所增加。该固定化重组脂肪酶同样能够拆分消旋体反式4甲氧苯基缩水甘油酸甲酯，光学选择性没有改变。反应14 h，转化率为48?5％，底物的e?e．值为99?2％，表明该固定化脂肪酶能有效拆分消旋体反式4甲氧苯基缩水甘油酸甲酯，为工业生物催化制备地尔硫卓提供了可能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏东芝	华东理工大学鲁华生物技术研究所生物反应器工程国家重点实验室	158	1415	22.0	29.0
2	马昱澍	华东理工大学鲁华生物技术研究所生物反应器工程国家重点实验室	10	26	3.0	4.0
3	苏二正	南京林业大学轻工科学与工程学院酶与发酵工程实验室	25	65	5.0	7.0
4	吴向萍	华东理工大学鲁华生物技术研究所生物反应器工程国家重点实验室	2	4	1.0	2.0
5	徐晶晶	华东理工大学鲁华生物技术研究所生物反应器工程国家重点实验室	1	1	1.0	1.0