葡萄糖异构酶基因的筛选、表达及酶学性质研究

• 作者: 刘成龙 廖承军 柳志强 毛宝军 程新平 郑微 陈德水 黄建峰
• 来源期刊: 发酵科技通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因挖掘 葡萄糖异构酶 表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 19-23
• 页数: 5页
• 分类号: Q814
• 字数: 3187字
• 语种: 中文

摘要

通过基因挖掘的方法从NCBI数据库中筛选得到一株嗜热的葡萄糖异构酶(GI)产生菌株Thermotoga petrophila RKU-1,化学合成该酶的基因并在大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)中进行可溶性表达.重组葡萄糖异构酶经过Ni-NTA柱亲和层析分离纯化后,对纯酶进行SDS-PAGE检测,结果显示为单一条带,其分子量大小为50.8 kDa.测定了该重组酶对底物D-葡萄糖的活力为19.8 U/mg,并对其酶学性质进行了表征.该酶最适温度和pH分别为85 ℃和7.0,Co2+对催化活力起着非常重要的作用,对底物D-葡萄糖的Km值和Vmax值分别为373 mmol/L和13.4 U/mg.在最适条件下,反应在4h内达到平衡,果糖得率最高达到53.8％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柳志强	浙江工业大学生物工程研究所	49	211	7.0	12.0
2	廖承军		4	4	1.0	1.0
3	黄建峰	浙江工业大学生物工程研究所	2	1	1.0	1.0
4	郑微	浙江工业大学生物工程研究所	1	1	1.0	1.0
5	刘成龙	浙江工业大学生物工程研究所	2	5	1.0	2.0
6	程新平		1	1	1.0	1.0
7	毛宝军		1	1	1.0	1.0
8	陈德水		1	1	1.0	1.0