牛奶β-乳球蛋白质实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 孙秀兰 张亦凡 张银志 贾敏
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: 牛奶过敏原质 β-乳球蛋白质 Taqman实时荧光定量PCR法 检测
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 605-612
• 页数: 8页
• 分类号: TS252.1|TS252.7
• 字数: 5477字
• 语种: 中文

摘要

建立一种快速、特异、灵敏的Taqman实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法，用于牛奶主要过敏原β-乳球蛋白质的检测。根据GenBank登录的牛β-乳球蛋白质的DNA序列设计，合成一对特异性引物和探针。将扩增产物连接到pMD19-T载体上，制备质粒标准品并测序鉴定，10倍梯度稀释含有β-乳球蛋白质基因的重组质粒，进行实时荧光定量PCR扩增，绘制标准曲线，检测该方法的特异性、稳定性、灵敏性，同时将建立的方法用于10种市售食品的检测。成功建立了β-乳球蛋白质的实时荧光定量PCR检测方法，标准曲线的Ct值与模板浓度在3.18×103～3.18×107copies范围内线性关系良好，R2值为0.9978；检测灵敏度高(318 copies/μL)；特异性强，对羊奶、豆浆DNA均无扩增反应；稳定性好，组内、组间的变异系数均在5%以内。对10种食品牛奶过敏原的检测结果与标签相符。表明所建立的实时荧光定量PCR方法可应用于食品中牛奶过敏原β-乳球蛋白质的检测并可推广到其它过敏原的检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张亦凡		2	6	1.0	2.0
2	贾敏	江南大学食品学院	5	34	4.0	5.0