食品中Escherichia coli O157∶H7微滴数字PCR绝对定量检测方法的建立

• 作者: 刘莉 张西萌 徐蕾蕊 曾静 李丹 马丹 魏咏新 魏海燕
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: Escherichia coli O157∶H7 微滴数字聚合酶链式反应 实时聚合酶链式反应 定量限 检出限
• 年，卷（期）: 2020,（16）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 259-265
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 7301字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20190320-266

摘要

为建立食品中Escherichia coli O157∶H7的微滴数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)快速定量检测方法,针对E.coli O157∶H7的特异性单拷贝基因hlyA设计引物探针,并进行特异性、灵敏度和重复性实验,同时通过人工污染三文鱼样品的检测,比较平板计数法、real-time PCR和ddPCR方法的测定值效果.结果表明,所建立的E.coli O157∶H7 ddPCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性.细菌纯培养液中定量限为105 CFU/mL,检出限为25 CFU/mL,人工污染三文鱼样品中检出限为110 CFU/g.对不同人工污染水平的三文鱼样品,ddPCR与平板计数的测定值结果无显著性差异(P＞0.05),比real-time PCR方法的测定值结果更加稳定、准确.因此,本研究建立的ddPCR方法能够更加快速、准确、灵敏、特异地绝对定量检测食品中E.coli O157∶H7.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘莉		4	0	0.0	0.0
2	曾静		6	0	0.0	0.0
3	李丹		4	0	0.0	0.0
4	马丹		4	0	0.0	0.0
5	徐蕾蕊		3	0	0.0	0.0
6	魏咏新		4	0	0.0	0.0
7	魏海燕		4	0	0.0	0.0
8	张西萌		4	0	0.0	0.0