水产品三种致病菌多重PCR检测方法的建立

• 作者: 王娜 陶妍
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: 多重PCR 副溶血弧菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术与发酵工程
• 页码范围: 397-402
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.6
• 字数: 4689字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-1689.2009.03.022

摘要

根据副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的耐热直接溶血素基因(tdh)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的耐热核酸酶基因(nuc)和单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)的侵入关联蛋白基因(iap)分别设计引物,进行PCR扩增及反应条件的优化,建立了对3种菌的多重PCR检测方法.结果表明:3对引物能特异性地扩增出202 bp、484 bp和714 bp的目的片段.优化后的多重PCR反应体系为:10×PCR buffer(Mg2+)2.5 μL、200 μmol/L dNTP、2 mmol/L Mg2+、模板2 μL、2.5 U Taq酶,引物浓度分别为:副溶血弧菌200 nmol/L、金黄色葡萄球菌40 nmol/L、单增李斯特菌320 nmol/L,总反应液25 μL.对贝类模拟样品的检测结果显示,应用多重PCR技术对3种菌的检测限分别为副溶血弧菌2.3×102 CFU/mL、金黄色葡萄球菌2.5×101 CFU/mL、单增李斯特菌1.5×103 CFU/mL.作者通过多重PCR技术实现了对副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的同时检测,具有快速、灵敏度高、特异性强等优点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶妍	上海海洋大学食品学院	34	379	6.0	19.0
2	王娜	上海海洋大学食品学院	12	42	3.0	6.0