牛凝乳酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建

• 作者: 姜媛媛 张健 张莉 杨贞耐
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 凝乳酶 克隆 原核表达载体 构建
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与发酵工程
• 页码范围: 271-275
• 分类号: Q785
• 字数: 3118字
• 语种: 中文

摘要

从小牛皱胃中提取凝乳酶(Chymosin)总RNA,经过RT-PCR获得凝乳酶 cDNA,纯化后与pMD-18T载体连接,转化大肠杆菌JM109,通过双酶切和序列测定,获得了凝乳酶全长基因序列.序列测定表明,凝乳酶全长核苷酸长度为1 143 bp,编码381个氨基酸.与GenBank上已发表序列NM_180994进行比较,核苷酸同源性为99.56%.将该基因片段克隆到原核表达载体pET-22b中,构建重组质粒pET-22b/Chymosin,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为凝乳酶的进一步表达奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨贞耐	吉林省农业科学院农产品加工研究中心	55	308	10.0	15.0
2	张莉	吉林省农业科学院农产品加工研究中心	13	49	5.0	6.0
3	姜媛媛	吉林省农业科学院农产品加工研究中心	33	172	6.0	13.0
4	张健	吉林省农业科学院农产品加工研究中心	20	72	4.0	8.0