褶牡蛎氨肽酶B的分离纯化和性质研究

• 作者: 唐逸 张凌晶 曹敏杰 翁凌 钟婵 颜龙杰
• 来源期刊: 食品科学技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: 牡蛎 氨肽酶 纯化 MALDI-TOF/TOF质谱
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 35-42
• 页数: 8页
• 分类号: TS254.1
• 字数: 5009字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-6002.2017.01.006

摘要

氨肽酶是一类能特异水解蛋白质N端氨基酸残基的外切酶,在食品行业有着广阔的应用前景.以褶牡蛎(Alectryonella plicatula)为原料,通过硫酸铵盐析,DEAE-sepharose,phenyl-sepharose及羟基磷灰石柱层析,分离纯化得到了一种高效水解碱性氨基酸的氨肽酶,其活性能被氨肽酶特异性抑制剂bestatin有效抑制.双向电泳结果显示该酶的分子质量约为100 ku,pI约为5.8.通过肽质量指纹图谱对其进行鉴定得到12个肽段,共含138个氨基酸残基,这些氨基酸序列与太平洋牡蛎中嘌呤霉素敏感性氨肽酶一致,表明纯化的酶为氨肽酶B.褶牡蛎氨肽酶B的二级结构以无规卷曲与反向平行为主,其中无规卷曲占42.6%,反向平行占32.0%.动力学研究获得其Km和kcat值分别为1.5μmol/L和117.5 s-1,kcat/Km为78.3 L/(μmol·s)-1.在35℃,pH值7.0的条件下,该酶具有最大催化活性,能高效水解氨肽酶底物Lys-MCA和Arg-MCA,释放出游离态的Lys和Arg,推测与牡蛎呈味相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翁凌	集美大学食品与生物工程学院	31	220	9.0	13.0
3	钟婵	集美大学食品与生物工程学院	6	24	4.0	4.0
4	张凌晶	集美大学食品与生物工程学院	27	185	9.0	12.0
6	颜龙杰	集美大学食品与生物工程学院	6	9	2.0	2.0
11	唐逸	集美大学食品与生物工程学院	1	1	1.0	1.0