工程大肠杆菌异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的诱导工艺研究

• 作者: 何太波 佟毅 吕哲 周卫强 唐堂 彭超 李义 汤维涛 王小艳 王靖 郭元亨 陈博
• 来源期刊: 发酵科技通讯
• 学科: 工学
• 关键词: 大肠杆菌 D-阿洛酮糖3-差向异构酶 D-阿洛酮糖 诱导工艺
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 工艺研究
• 页码范围: 192-196
• 页数: 5页
• 分类号: TQ92
• 字数: 3738字
• 语种: 中文

摘要

以异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-psicose 3-epimerase,缩写为DPEase)的工程大肠杆菌为出发菌株,在5L发酵罐培养的基础上,系统研究了大肠杆菌异源表达DPEase酶的诱导工艺.通过依次考察诱导时间点、诱导温度、诱导pH和诱导剂用量对工程大肠杆菌生长和DPEase酶活(单位时间内的转化率)的影响,综合考虑能耗和发酵周期,确定相应的最佳控制点,系统优化诱导条件.结果表明:指数生长期进行诱导,诱导前培养温度由37 ℃降至25 ℃、p H 恒定7.0 、IPTG诱导剂添加终浓度为0.5 mmol/L,可以理想平衡菌体生长和蛋白酶表达,反应30 min的DPEase酶平衡转化率达到28％左右,达到已公开报道的平均水平,为后续的生物转化工艺模索提供原料供应.