根癌农杆菌D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因克隆、 结构预测及原核表达

• 作者: 吴芸 姜绍通 朱星星 杜明睿 杨培周
• 来源期刊: 食品科学技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: D-阿洛酮糖-3-差向异构酶 D-阿洛酮糖 根癌农杆菌 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 61-66
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 3831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-6002.2019.03.008

摘要

D-阿洛酮糖-3-差向异构酶能够催化D-果糖转化为D-阿洛酮糖.为实现D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的异源表达,设计引物,克隆并分离其序列,通过生物信息学软件分析D-阿洛酮糖-3-差向异构酶DNA和蛋白质的结构特点.结果表明,该基因开放阅读框870 bp,编码289个氨基酸;蛋白质二级结构中α-螺旋占38.41％,β-折叠占47.06％,无规则卷曲占14.53％;该蛋白为亲水性蛋白,不含信号肽,无跨膜区,定位于细胞膜;构建原核表达载体并导入E.coli BL21宿主中,表达的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶分子质量约为33 kDa,1 mmol/L IPTG诱导E.coli BL21重组菌28 h后,目的蛋白表达量和酶活分别为0.32 g/L和3.8 U/mL.根癌农杆菌D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因能够在大肠杆菌中实现表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜绍通	合肥工业大学食品与生物工程学院/安徽省农产品精深加工省级实验室	398	4557	29.0	43.0