黑曲霉内切β-1,4-半乳聚糖酶AghA的分子克隆与特征解析

• 作者: 刘晓光 王君 王太康 王正祥 田康明 董自星 蔡可 金鹏
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 内切β-1,4-半乳聚糖酶 低聚半乳糖 黑曲霉 分子克隆 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 29-35
• 页数: 7页
• 字数: 5402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.017756

摘要

利用内切β-1,4-半乳聚糖酶(endo-β-1,4-galactanase,EC 3.2.1.89)水解土豆浆制备低聚半乳糖,有望解决产品回收率低的问题.为此,该研究通过分子克隆技术,将黑曲霉β-1,4-半乳聚糖酶基因aghA在毕赤酵母中进行克隆表达,构建获得了重组菌GS115(pPIC-aghA).摇瓶培养条件下,重组酶AghA的酶活为130 U/mL,高于大多数已报道的半乳聚糖酶的酶活.酶学性质的研究表明,该酶的最适反应pH值和温度分别为4.5和45℃,且在pH 4.0 ～6.0或30 ～ 50℃具有较好稳定性.大部分金属离子和EDTA对重组酶AghA的酶活没有显著影响;Fe3+对其活性有强烈的抑制作用;而Hg2则可使AghA几乎完全失活.该酶对半乳聚糖的最大反应速率Vmax和米氏常数Km分别为400 mg/(mL·min)和0.08 mg/mL.此外,重组酶AghA还可以水解土豆浆,产生半乳二糖、半乳三糖和少量半乳四糖等低聚半乳糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董自星	天津科技大学化工与材料学院	14	15	3.0	3.0
2	刘晓光	天津科技大学化工与材料学院	15	16	3.0	3.0
3	金鹏	天津科技大学化工与材料学院	16	9	2.0	2.0
4	田康明	天津科技大学化工与材料学院	19	18	3.0	3.0
5	王君	天津科技大学生物工程学院	4	3	1.0	1.0
6	蔡可	天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
7	王太康	天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0