白地霉ch-3脂肪酶Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 付建红 姚斌 杨浩萌 欧阳平凯 石玉瑚
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 白地霉ch-3 脂肪酶 基因克隆
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 68-73
• 页数: 6页
• 分类号: Q812
• 字数: 4198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2008.03.013

摘要

构建了白地霉脂肪酶Ⅰ的基因工程菌,为进一步进行蛋白质工程改造和脂肪酶应用奠定了基础.从新疆昌吉市油脂化工厂含油冻土中分离得到1株低温脂肪酶产生菌-白地霉ch-3.该菌发酵上清液中的脂肪酶最适作用温度为35 ℃,在0 ℃仍可保持66 %的相对酶活力.应用PCR技术从白地霉ch-3基因组DNA中克隆得到脂肪酶Ⅰ基因lip1,将该基因与原核表达质粒载体pET-22b(+)连接,构建重组质粒pET-lip1,转化E.coli BL21(DE3),酶切鉴定,筛选得到重组菌.十二烷基磺酸钠-聚丙希酰胺(SDS-PAGE)显示重组脂肪酶Ⅰ的相对分子质量约为5.8×104,酶活为2.73 U/mL,表明lip1基因的表达产物具有正常的生物学活性.白地霉ch-3脂肪酶Ⅰ基因lip1能够在大肠杆菌中有效地表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	欧阳平凯	南京工业大学制药与生命科学学院	194	2558	26.0	40.0
2	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
3	杨浩萌	中国农业科学院饲料研究所	9	173	6.0	9.0
4	石玉瑚	南京工业大学制药与生命科学学院	8	59	5.0	7.0
8	付建红	南京工业大学制药与生命科学学院	5	54	5.0	5.0