莱茵衣藻IFT25的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备

• 作者: 孟德梅 樊振川 王震 董彬
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 莱茵衣藻 纤毛 IFT25 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 903-908
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4463字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2018.09.002

摘要

IFT25是维持纤毛运动和感知所必须元件纤毛内运输蛋白IFT复合物B中的重要组分之一,探索IFT25尤其在模式生物菜茵衣藻中的作用机制具有重要作用.作者采用经济和简单的方法,制备莱茵衣藻IFT25的兔源多克隆抗体.将ift25分别连接到pMAL-c2X-和pET-28a(+)-载体上,转入大肠杆菌BL21 (DE3),用IPTG诱导大量表达,并经亲和纯化后蛋白质纯度超过90％.通过颈背部皮下多次免疫8周龄大的新西兰大白兔,制备多克隆抗体,取第五次免疫后血清用ELISA测定效价超过128 000.抗血清依次经过Protein A和硝酸纤维素膜纯化后,用Western blotting检测抗体特异性,结果表明制备的抗体可以特异性识别菜茵衣藻中的IFT25,为IFT25作用机制的阐明和纤毛相关疾病的诊断提供了重要理论和方法支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊振川	天津科技大学教育部食品营养与安全重点实验室	7	19	2.0	4.0
7	王震	天津科技大学教育部食品营养与安全重点实验室	2	4	2.0	2.0
8	董彬	天津科技大学教育部食品营养与安全重点实验室	4	15	2.0	3.0