不同β-葡萄糖苷酶性能分析及对罗汉果苷的转化

• 作者: 李家霖 李玉 李登科 王欣驰 胡小妍 路福平 陈雪佳
• 来源期刊: 食品科学技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: β-葡萄糖苷酶 克隆表达 酶学性质 酶法转化 罗汉果苷
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 48-54
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.3|Q814
• 字数: 4136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-6002.2019.03.006

摘要

以Pichia pastoris GS115为宿主,对来源于特异腐质霉Humicolainsolens、棘孢曲霉Aspergillus aculeatus和黑曲霉Aspergillus niger的β-葡萄糖苷酶基因bglHi、bglAa和bglAn进行异源表达.以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物,分析了3种酶的酶学性质,其中BglAn的酶活力最高,为90.83 U/mg.3种酶的最适反应温度和最适pH值范围分别为55～65℃和5.0～6.0.在pH值为6.0、温度50℃、酶量2U的条件下,利用3种酶水解不同浓度的罗汉果苷Ⅴ.结果表明:不同来源的酶水解底物的特异性差别较大,其中BglHi和BglAa水解罗汉果苷Ⅴ生成罗汉果苷ⅢE的转化率较低,仅为5％ ～7％;而BglAn在底物质量浓度1 mg/mL,反应20 min时转化率为96.5％;提高底物质量浓度到5 mg/mL,反应1 h时转化率也可达97.9％,基本实现完全转化.通过酶法转化罗汉果苷Ⅴ,获得了较高纯度的产物罗汉果苷ⅢE,为后期开发不同结构、不同功能罗汉果苷类甜剂提供了新的途径.