定点突变提高枯草芽孢杆菌L-天冬酰胺酶的活力及稳定性

• 作者: 张显 徐美娟 杨套伟 饶志明 龙水清
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: L-天冬酰胺酶 定点突变 热稳定性 pH稳定性
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1128-1134
• 页数: 7页
• 分类号: Q789
• 字数: 4413字
• 语种: 中文

摘要

L-天冬酰胺酶可以催化L-天冬酰胺转化为L-天冬氨酸和氨.它可以通过降解食品原料中的L-天冬酰胺而降低高温烹制食品中丙烯酰胺的含量.由于食品预处理环境的复杂性,只有具有高酶活且稳定的酶才能满足食品生产中的应用.作者通过点突变提高来源于Bacillus subtilis B11-06的L-天冬酰胺酶(BsAⅡ)的酶活和热稳定性.通过序列比对和同源模拟选择5个点进行突变,构建6个突变菌株.酶活测定结果表明,突变体酶S299Nansz和P348Aansz的酶活较BsAⅡ分别提高28％和32％.其中P348Aansz的热稳定性和pH稳定性较BsAⅡ均有明显提高.本研究表明,第299和348位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响,对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础,并提高了该酶的工业应用潜力.