毕赤酵母系统来源的重组人血清白蛋白的制备及初步晶体学分析

• 作者: 郭瑞庭 金坚 陈蕴 黄鹏飞
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人血清白蛋白 纯化 结晶 晶体结构 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 151-157
• 页数: 7页
• 分类号: R915
• 字数: 5327字
• 语种: 中文

摘要

人血清白蛋白（human serum albumin，HSA），为血浆中含量最丰富的蛋白质，具有调控血液中的功能蛋白质、脂肪酸、激素、药物和维持血液渗透压功能。毕赤酵母工程菌Pichia pastoris GSll5/pPIC9K-rHSA经50 L发酵罐发酵，发酵液冷冻离心，上清液超滤浓缩后，依次通过Blue Sepharose 6FF亲和层析、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析和SP Sepharose 6FF离子层析纯化，实现rHSA的规模化制备，最终rHSA的纯度可达99.9%以上。通过rHSA的结晶条件筛选实验，筛选出沉淀剂分别为PEG 1500、PEG 3350、PEG 6000、MPEG 2000和MPEG 5000五种结晶条件，结晶环境均为疏水性环境，并且结晶环境不能含有类似DTT的强还原剂。其中沉淀剂为MPEG 2000条件下优化出的rHSA和pHSA蛋白晶体经X光衍射分辨率最好，分别为3.4?和3.1?，通过分子置换法得到rHSA和pHSA的晶体结构，二者结构大体相似，为rHSA在临床上的应用和HSA融合蛋白的晶体结构研究提供可靠的依据和基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金坚	江南大学药学院	196	1025	16.0	22.0
2	陈蕴	江南大学药学院	85	685	13.0	23.0
3	郭瑞庭	中国科学院天津工业生物技术研究所	5	6	1.0	2.0
4	黄鹏飞	江南大学药学院	1	6	1.0	1.0