共表达伴侣蛋白对毕赤酵母产β-甘露聚糖酶发酵过程的影响

• 作者: 张晓龙 王兴吉 王正祥 王瑞明 肖静
• 来源期刊: 食品工业
• 关键词: 二硫键异构酶 免疫球重链结合蛋白 β-甘露聚糖酶 毕赤酵母 高密度发酵表达
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 研究探讨
• 页码范围: 189-193
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

通过分别共表达伴侣蛋白PDI和Bip获得β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达.根据Gen Bank公布的毕赤酵母PDI和Bip序列设计引物,以酵母基因组为模板PCR扩增目的基因片段,插入表达载体pPICZαA,分别整合到β-甘露聚糖酶工程菌中,筛选共表达二硫键异构酶的重组酵母(PM115)和共表达免疫球重链结合蛋白的重组酵母(BM115),在30L发酵罐水平上分析两种共表达伴侣蛋白菌株与初始菌株(GM115)对β-甘露聚糖酶表达的差异.相同工艺下,PM115与原始菌株相比未有提高,而BM115发酵产酶能力高于原始菌株,最高酶活达到40 900 U/mL,最高总蛋白表达量13.22 g/L,最高比酶活达到3 150 U/mg,分别比初始菌株提高38％,22％和18％.毕赤酵母基因工程菌GM115通过共表达伴侣蛋白Bip,提高了-甘露聚糖酶的产量和比活力,达到工业化生产水平.