嗜热放线菌海藻糖合成酶在地衣芽孢杆菌中的异源表达

• 作者: 丁重阳 张梁 李由然 杨韵霏 王珊瑛 石贵阳 顾正华
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 海藻糖合成酶 嗜热放线菌 地衣芽孢杆菌 诱导表达
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1148-1155
• 页数: 8页
• 分类号: Q814
• 字数: 5503字
• 语种: 中文

摘要

海藻糖合成酶可将麦芽糖异构化为海藻糖,是海藻糖酶法生物转化的中心酶制剂.为了实现海藻糖合成酶在食品安全型表达宿主中高效生产,进而应用于食品级海藻糖的酶法合成,构建了革兰氏阳性菌重组表达质粒并转化入地衣芽孢杆菌重组质粒携带了来自于嗜热放线菌Thermomonospora curvata海藻糖合成酶的编码基因,在地衣芽孢杆菌木糖异构酶启动子及其阻遏蛋白的介导下表达,胞内海藻糖合成酶发酵活力为12.1 U/mL.考察了不同培养条件对重组菌生长和产酶的影响,结果显示质量分数4％的麦芽糊精和质量分数0.4％的豆饼粉分别为产酶适宜的碳源和氮源;菌体培养10h后加入终质量浓度为1g/dL的诱导剂,于37℃诱导12h后重组菌产酶最高达到23.7 U/mL.