食品中蜡样芽胞杆菌实时荧光RPA检测方法的建立与应用

• 作者: 刘立兵 南汇珠 姜彦芬 孙晓霞 王建昌 王金凤
• 来源期刊: 食品科学技术学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蜡样芽胞杆菌 等温扩增 实时荧光RPA 检测方法
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 安全监管
• 页码范围: 89-94
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.4|R155.5|Q93-3
• 字数: 3119字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-6002.2018.01.012

摘要

为实现简便快速地检测蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),根据GenBank中蜡样芽胞杆菌16S RNA序列设计特异性引物和exo探针,建立了一种实时荧光重组酶聚合酶扩增方法,在39℃恒温下仅需20 min即可完成检测.该方法特异性扩增蜡样芽胞杆菌16S RNA基因片段,对其他芽胞杆菌和非芽胞杆菌无扩增;以蜡样芽胞杆菌基因组DNA作为模板,该方法的检测灵敏度为1.0×10-3 ng/μL,同已发表的real-time PCR方法一致.人工污染实验表明,当大米饭中蜡样芽胞杆菌污染量≥1.5×104 CFU/g时,即可通过real-time RPA方法检出,所需时间仅为6～13min;而当污染量≥1.5×105 CFU/g时,才能通过real-time PCR方法检出,所需时间至少为30 min(Ct值为20 ～31).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓霞	河北出入境检验检疫局技术中心	18	137	7.0	11.0
3	王建昌	河北出入境检验检疫局技术中心	38	161	6.0	10.0
4	王金凤	河北出入境检验检疫局技术中心	25	113	5.0	9.0
5	刘立兵	河北出入境检验检疫局技术中心	9	65	4.0	8.0
7	姜彦芬	河北出入境检验检疫局技术中心	8	31	3.0	5.0
10	南汇珠	河北出入境检验检疫局技术中心	1	8	1.0	1.0