淀粉结合域与α-淀粉酶的融合表达及其酶学性质

• 作者: 杨键 王青艳 金辉 黄日波
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 工学
• 关键词: 嵌合酶 淀粉结合域 热稳定性
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 39-43
• 分类号: TS231|Q786
• 字数: 2393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2010.05.009

摘要

利用RT-PCR从Rhizopus oryzae GX-08总RNA中克隆到糖化酶的淀粉结合域(SBD)基因(sbd),将该基因片段插入α-淀粉酶(CN7A)基因cn7a的5′端构建融合表达质粒pSE-sbdcn7a.嵌合酶SBD-CN7A在Escherichia coli JM109表达,并经Ni-NTA、Sephacryl S300纯化.酶学性质研究表明:嵌合酶在最适作用条件方面与原始酶并无明显差别;在以生玉米粉为底物时,其比酶活提高了8.7倍,而以可溶性淀粉为底物时其比酶活是原始酶的1.8倍,Km也从3.784 g/L降低为2.234 g/L;嵌合酶在65 ℃下的半衰期从10 min缩短为4 min.结果表明,淀粉结合域SBD的融合赋予了α-淀粉酶CN7A水解生淀粉的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王青艳		19	145	7.0	11.0
3	杨键		1	2	1.0	1.0
7	金辉		1	2	1.0	1.0
13	黄日波		1	2	1.0	1.0