优化黑曲霉柠檬酸生产菌株原生质体形成条件及表达系统的建立

• 作者: 刘龙 堵国成 庞冬洽 李江华 殷娴 陈坚 韩瑞枝
• 来源期刊: 食品与生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑曲霉 柠檬酸 原生质体 共转化
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 963-970
• 页数: 8页
• 分类号: Q93
• 字数: 6335字
• 语种: 中文

摘要

优化了黑曲霉柠檬酸生产菌株的原生质体形成条件并建立基因表达系统.利用酶解法制备原生质体,最优的酶解液配比为5 mg/mL溶壁酶、0.2 U/mL几丁质酶和460 U/mL葡萄糖醛酸酶.最优的渗透压稳定剂为0.7 mol/L KCI,茵丝层厚度50 μm,茵体量为0.003 g/mL.在培养基中添加1 mmol/L Mn2+有助于减少原生质体形成所需的酶量,在培养基中添加葡萄糖醛酸酶有助于得到独立的孢子进行萌发,从而促进原生质体的形成.利用共转化的方式,可以同时将两个表达框整合到基因组上并实现基因表达.