磷脂酶A1辅助蛋白N端截短菌株的构建及其优化表达

• 作者: 朱昊 杨蒙 王洲 薛正莲 陈阿娜
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 磷脂酶A1辅助蛋白PlaS N端截短 原核表达 表达条件优化
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 34-38
• 页数: 5页
• 字数: 4196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.016533

摘要

根据GenBank公布的磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因序列,通过生物信息学软件分析,截短辅助蛋白PlaS的N端35AA.将截短后的辅助蛋白plaS基因经PCR扩增技术与原核表达载体pET-28a(+)连接,再转化到BL21 (DE3)宿主菌中进行融合表达,从而成功构建dSP28表达菌株.用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导辅助蛋白表达,对诱导时间、IPTG浓度、起始菌体浓度(OD600nm)和温度逐项进行优化,摸索得到辅助蛋白的最佳诱导表达条件为诱导时间8h,IPTG浓度0.2 mmol/L,起始体浓度(OD600nm)0.7,温度40℃,转速200 r/min.在此条件下,对P28、SP28和dSP28发酵中0D600nm进行测定,结果表明,加入IPTG诱导后P28和dSP28能够快速的增殖,且诱导8h后仍显示增长趋势,而SP28的生长受到明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛正莲	安徽工程大学生物与化学工程学院	152	710	15.0	17.0
3	王洲	安徽工程大学生物与化学工程学院	41	98	5.0	7.0
4	陈阿娜	安徽工程大学生物与化学工程学院	19	168	8.0	12.0
8	朱昊	安徽工程大学生物与化学工程学院	3	3	1.0	1.0
9	杨蒙	安徽工程大学生物与化学工程学院	3	3	1.0	1.0