海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达

• 作者: 严芬 吴晨烁 李晓月 秦明珍
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 褐藻胶裂解酶 假交替单胞菌 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 77-82
• 页数: 6页
• 字数: 3067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018288

摘要

从海洋来源的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质.通过Touch down PCR与热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)从假交替单胞菌B1基因组中扩增到1个褐藻胶裂解酶基因(B1SM),将目的基因插入到pGEX-4T-1载体,转化到宿主大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21 (DE3).结果显示,从菌株B1克隆得到褐藻胶裂解酶基因B1SM,序列长度为1 005 bp,编码334个氨基酸,理论等电点为8.51,编码蛋白质的理论分子质量为37.13 kDa.重组褐藻胶裂解酶B1SM的最适pH和温度分别为8.0和25℃.该褐藻胶裂解酶在pH 7.0 ～9.0范围内,25℃下保温1h,仍剩余60％以上活力,pH稳定性较好.在最适pH 8.0和30℃下保温1h重组酶仍剩余60％以上活力.该研究为褐藻胶裂解酶基因B1SM在E.coli BL21(DE3)中实现了异源表达,为褐藻胶裂解酶的制备和研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严芬	福州大学生物科学与工程学院	18	93	6.0	9.0
2	吴晨烁	福州大学生物科学与工程学院	4	16	2.0	4.0
3	李晓月	福州大学生物科学与工程学院	2	2	1.0	1.0
4	秦明珍	福州大学生物科学与工程学院	1	2	1.0	1.0