基于短小芽孢杆菌转录组的强启动子鉴定

• 作者: 姚动邦 张康 朱昫飏 吴敬
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 短小芽孢杆菌 α-淀粉酶 RNA测序 启动子 3L罐发酵
• 年，卷（期）: 2021,（18）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 15-22
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.026660

摘要

短小芽孢杆菌( Brevibacillus choshinensis)是一种潜在的高效表达系统,但由于高效强启动子的缺乏严重限制了该表达系统的应用.该研究的主要目的是为 B. choshinensis 表达系统提供更多新高效强启动子.在该研究中,首先通过转录组测序技术获得 B. choshinensis的转录组数据.然后基于基因的转录水平及功能,筛选高表达目的基因.基于筛选到的目的基因的启动子序列,以α-淀粉酶为报告蛋白构建了强启动子筛选文库.将含有不同启动子的重组菌摇瓶发酵后,以胞外α-淀粉酶活性为筛选指标,获得了内源性强启动子PE和PF,对应的重组菌 BCWES和BCWFS胞外α-淀粉酶活性分别是常用的强启动子P2 介导的对照菌BCWPS胞外α-淀粉酶活性的2. 3 和1. 3 倍.最后以蔗糖异构酶和角质酶为新的报告蛋白证明了 PE 启动子具有通用性,且经3 L 罐发酵进一步验证了重组菌 BCWES高分泌生产 α-淀粉酶的能力.该研究丰富了可用于 B. choshinensis 表达系统的强启动子数量,促进了 B. choshinensis作为一种新高效表达系统的开发与应用.