重组毕赤酵母生产β-葡萄糖苷酶发酵条件 优化及固定化研究

• 作者: 吴敬 汪飞 陈晟
• 来源期刊: 食品科学技术学报
• 学科: 工学
• 关键词: β-葡萄糖苷酶 毕赤酵母 发酵优化 固定化 低聚龙胆糖
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 41-47
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.3|Q814
• 字数: 3228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-6002.2019.03.005

摘要

为了实现绿色木霉菌Trichoderma viride来源的β-葡萄糖苷酶在重组毕赤酵母中的高效表达,对重组菌P.pastoris KM71/pPIC9K-bgl1/pPICZ A-pdi进行3.6 L罐发酵培养条件优化.结果表明,当诱导温度28℃,初始诱导菌体浓度50 g/L,诱导阶段甲醇体积分数1.0％时,酶活力最高,能达到1452 U/mL.同时以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂,采用吸附交联法对β-葡萄糖苷酶进行固定化.结果表明,当壳聚糖质量浓度0.03 g/mL,戊二醛质量浓度0.008 g/mL,游离酶添加量400 U/g(1 g壳聚糖微球加酶量为400 U),固定化吸附时间20 h时,固定化酶酶活回收率最高,达到65.4％.以800 g/L葡萄糖为底物,优化的转化条件下连续转化6次,低聚龙胆糖产率仍达到15.2％,显示出该固定化酶具有较好的持续利用性及较高的低聚龙胆糖生产能力.