米曲霉(Aspergillus oryzae FAFU)淀粉酶的分离纯化及其酶学性质研究

• 作者: 倪莉 刘斌 吕旭聪 周文斌 田玉庭 胡荣康 贾瑞博 陈绍军 饶平凡
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 米曲霉 淀粉酶 分离纯化 酶学特性
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 71-76
• 页数: 6页
• 字数: 4382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201611012

摘要

从米曲霉(Aspergillus oryzae FAFU)发酵产物中提取淀粉酶,通过硫酸铵盐析、透析、DEAE-Sepharose离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶柱层析等纯化步骤,回收活性组分,结合十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行纯度鉴定,共分离纯化出3种酶:酶Ⅰ、酶Ⅱ、酶Ⅲ.通过酶解淀粉实验,酶解产物经薄层层析(TLC)分析,鉴定出酶Ⅰ、酶Ⅱ为液化酶,酶Ⅲ为糖化酶,经SDS-PAGE电泳确定分子量大小分别为:48.6、49.7、93.5 kDa.对酶Ⅰ、酶Ⅱ的酶学性质进行初步的探究:酶Ⅰ的最适反应温度为50℃,温度在50℃以下稳定性好,55℃的半衰期是40 min,最适反应pH为6.0,在pH7.2～9.6范围内稳定性好;酶Ⅱ的最适反应温度为50℃,温度在45℃以下稳定性好,50℃的半衰期是30 min,最适反应pH为6.6,在pH8.6 ～ 10.0范围内稳定性好.