应用微滴式数字聚合酶链式反应定量检测 牛肉制品中的猪源性成分

• 作者: 付琦 刘立兵 周巍 孙晓霞 王建昌 王素华 王金凤 石蕊寒 郭春海 项佳林
• 来源期刊: 肉类研究
• 学科: 工学
• 关键词: 微滴式数字聚合酶链式反应 牛肉 猪肉 定量检测
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 29-34
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.3
• 字数: 6007字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/rlyj1001-8123-201809006

摘要

参照GB/T 25165—2010《明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法实时荧光聚合酶链式反应法》,以牛的生长激素(growth hormone,GH)基因和猪的朊蛋白(prion protein,PRNP)基因2种核基因为靶基因合成特异性引物和探针.理论推导单位质量牛肉的GH基因与猪肉PRNP基因拷贝数之比为一固定值,通过微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)方法对该固定值进行检测和验证,并以该固定值对牛肉/猪肉人工混合样本和市售牛肉制品中的猪肉成分进行定量检测.结果表明:该方法具有良好的准确性及可重复性;牛肉中掺杂猪肉质量分数在5％～99％范围内时,检测结果绝对误差小于1.28％,变异系数小于6.5％,猪肉成分的回收率为99.09％～102.80％;20份牛肉制品中,4份检出猪肉成分,其中3份的相对含量为29.19％～98.15％,1份为0.12％(低于本方法检出限5％).因此,ddPCR方法可以较好地应用于牛肉制品中掺杂猪肉成分的定量检测.