分子对接和定点突变提高内切菊粉酶的催化活力

• 作者: 包敏 钮成拓 陈玙捷 郑飞云 王金晶 刘春凤 李崎
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 内切菊粉酶 同源建模 分子对接 定点突变 催化活力
• 年，卷（期）: 2021,（19）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 57-62
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023984

摘要

内切菊粉酶可以有效地水解菊粉得到低聚果糖(inulooligosaccharides,IOS).低聚果糖是一种强效益生元,对人体健康有益,具有广泛应用价值.前期研究获得了Lipomyces starkeyi NRRL Y-11557来源的内切菊粉基因inu3B,并在大肠杆菌中进行了克隆表达.为进一步提高该酶催化活力,利用同源建模预测INU3B的三维结构,结合分子对接技术确定底物结合口袋附近的氨基酸,将筛选的关键氨基酸分别突变成丙氨酸,获得突变体M46A,比酶活力达到2611.40 U/mg,是原始酶的1.26倍.这可能是由于该位点的改变减小了结合口袋的外表面积、体积和深度,增强了酶与底物结合,从而增加了酶活力.M46A突变株具有工业生产低聚果糖的应用前景,也为定点突变技术改造酶活性提供了新思路.