鸡蛋过敏原卵转铁蛋白标准物质候选物的研究

• 作者: 佟平 吴志华 周煌 袁锦 陈红兵 高金燕
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 鸡蛋过敏原 卵转铁蛋白 标准物质候选物
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 营养与保健
• 页码范围: 342-347
• 分类号: TS253.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2017.04.056

摘要

目的:制备高纯度的鸡蛋过敏原卵转铁蛋白,并详细表征其理化性质及免疫学性质,满足标准物质候选物的质量要求.方法:通过两步柱层析法制备卵转铁蛋白并分装、冻干,然后借助质谱鉴定身份;采用SDS-PAGE银染方法鉴定纯度,圆二色光谱、荧光光谱和核磁共振表征高级结构;利用Bradford法检测含量和SDS-PAGE银染方法评估稳定性,间接ELISA方法评估其与IgE结合能力.结果:制备的蛋白经质谱鉴定为鸡蛋卵转铁蛋白,分子量约79.55 ku,等电点为6.85,纯度高达94.6％;结构分析显示,制备的卵铁蛋白保留了其天然结构特性,并且冻干未使卵转铁蛋白的结构产生明显的变化;在4℃条件下储藏5个月,卵转铁蛋白的含量、纯度、结构和免疫学活性均无明显变化.结论:制备的卵转铁蛋白可作为标准物质候选物.