蜡状芽孢杆菌CZ磷酸甘露糖异构酶基因的克隆表达及酶学性质研究

• 作者: 宋妍 崔堂兵 张瑶
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 磷酸甘露糖异构酶(PMI) 蜡状芽孢杆菌 克隆表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 195-200
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2017.06.029

摘要

将蜡状芽孢杆菌CZ中的磷酸甘露糖异构酶基因(pmi)进行克隆,并在大肠杆菌中进行异源表达.将PCR扩增得到的pmi基因与pET-22b(+)表达载体进行连接,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建重组菌株BL21-pET22b(+)-pmi,并成功表达了重组磷酸甘露糖异构酶.结果显示:克隆得到pmi基因序列全长为948 bp,编码315个氨基酸.通过镍柱HisTrap HP亲和层析法纯化得到具有活性的重组酶,其蛋白分子大小约为40.8 ku.酶学性质结果显示:该酶的最适反应温度为35℃,在30～40℃酶活力相对稳定;最适pH为7.0,在弱碱性条件下保存12 h后仍存有50％以上酶活力;不同低浓度的金属离子Ni2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+和Mg2+均对该酶表现出不同程度的激活作用,其中Mn2+对该酶激活作用最显著,当其浓度为1 mmol/L时,激活作用最大,而Co2+对其有明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔堂兵	华南理工大学生物科学与工程学院	47	767	15.0	26.0
2	张瑶	华南理工大学生物科学与工程学院	5	4	1.0	2.0
3	宋妍	华南理工大学生物科学与工程学院	2	2	1.0	1.0