产脂肪酶重组菌SRI-01随机突变及诱导表达条件的研究

• 作者: 吴欣森 尹金凤 李泓全
• 来源期刊: 中国酿造
• 学科: 工学
• 关键词: 产脂肪酶重组菌 随机突变 诱导表达 脂肪酶活力 条件优化
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 56-61
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 6140字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11882/j.issn.0254-5071.2018.08.012

摘要

采用大引物全质粒法(MEGAWHOP)随机突变,快速有效地对研究室前期构建的一株脂肪酶重组菌株SRI-01进行分子改造,通过对易错聚合酶链反应(ep-PCP)获得的2 300个突变株进行96孔板高通量筛选,得到一株优良突变株SRM08.通过单因素试验,优化诱导前的菌体生物量、诱导剂异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的浓度、CaCl2的浓度、诱导温度.通过比较3种不同破碎缓冲液浓度和缓冲液pH对脂肪酶活力的影响,选择最优的破碎缓冲液.确定突变株SRM08最佳诱导表达条件为菌液生物量OD600nm直为0.7,IPTG的浓度为0.1 mmol/L,CaCl2浓度为4mmol/L,诱导温度为25℃,采用5mmol/L磷酸钠缓冲液为破碎缓冲液,pH值为7.0.在此优化条件下,脂肪酶活达到88 508 U/L,为原重组菌株SRI-01的2.84倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹金凤		3	17	2.0	3.0
2	吴欣森		2	15	1.0	2.0
3	李泓全		3	17	2.0	3.0