来源于Dictyoglomus sp.NZ13-RE01的纤维二糖差向异构酶酶学性质和乳果糖制备研究

• 作者: 诸亚锋 徐铮
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 纤维二糖差向异构酶 酶学性质 乳果糖 重组大肠杆菌 酶催化
• 年，卷（期）: 2021,（13）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-15
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.026109

摘要

为高效制备纤维二糖差向异构酶,用于乳果糖生产,将来源于网团菌属Dictyoglomus sp.NZ13-RE01的纤维二糖差向异构酶基因引入到载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28a-NZ13-CE并转化表达宿主E.coli BL21(DE3),得到生产菌株BL21(DE3)-V1.该菌株在摇瓶中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thioga-lactopyranoside,IPTG)诱导24 h后得到最高酶活力为0.53 U/mL的发酵液,在7.5 L发酵罐中高密度发酵,表达酶活力提升了8.1倍,达到4.30 U/mL发酵液.通过镍离子亲和层析柱纯化重组酶,研究NZ13-CE的酶学性质:该酶的最适反应温度为80℃,最适pH为8.0,分子质量为45.5 kDa,80℃下重组酶的活性半衰期为182 min,催化乳糖至乳果糖的最高转化率为52.5％,且依匹乳糖占总糖含量仅为9％.研究结果表明,NZ13-CE酶具有工业化生产乳果糖的应用潜力.