微滴式数字聚合酶链式反应对香肠制品中鸡、猪、牛源性成分的定量分析

• 作者: 付琦 刘立兵 周巍 孙晓霞 张亦琴 王建昌 郭春海 钱云开 陈敏娜
• 来源期刊: 肉类研究
• 学科: 工学
• 关键词: 微滴式数字聚合酶链式反应 鸡、猪、牛源性成分 定量分析 肉类掺假
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 51-56
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/rlyj1001-8123-20200508-115

摘要

为实现肉制品中动物源性成分的定量检测,基于微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR),以鸡的转化生长因子β-3基因、猪的朊蛋白基因和牛的生长激素基因为靶基因,建立香肠制品中鸡、猪、牛源性成分的定量检测方法.结果 表明:所建立ddPCR方法特异性强,能特异性检测相应的鸡、猪、牛源性成分;根据肉粉质量(mg)与DNA质量浓度(ng/μL)、DNA质量浓度(ng/μL)与基因拷贝数浓度(copies/μL)之间的线性关系,得到鸡肉粉、猪肉粉和牛肉粉质量(x1)与基因拷贝数浓度(y2)之间的关系式为:鸡:x1=n×y2/273.946-n/886.557+0.216;猪:x1=n×y2/64.950+n/60.644+0.215;牛:x1=n×y2/62.839+n/12.646+1.218(n为稀释倍数);基于建立的ddPCR方法对64份市售不同种类香肠样品进行检测,在1份原料标识仅为“猪肉”的香肠中检出鸡源性成分含量为18.68％.本研究建立的ddPCR方法能够实现香肠中鸡、猪、牛源性成分的准确定量检测,并可以此判断“蓄意掺假”或“无意带入”.